Новы набор для ПЦР у рэжыме рэальнага часу для новага каранавіруса (SARS-CoV-2).
Гэты вельмі адчувальны, гатовы да выкарыстання набор для ПЦР даступны ў ліафілізаваным фармаце (працэс сублімацыйнай сушкі) для працяглага захоўвання.Набор можна перавозіць і захоўваць пры пакаёвай тэмпературы і стабільны на працягу аднаго года.Кожная прабірка прэмікса змяшчае ўсе рэагенты, неабходныя для ПЦР-ампліфікацыі, уключаючы зваротную транскриптазу, Taq-палімеразу, праймеры, зонды і субстраты dNTP.Трэба толькі дадаць 13 мкл дыстыляванай вады і 5 мкл экстрагаванай РНК-мадэллю, затым яе можна запусціць і ўзмацніць на прыборах ПЦР.
Апарат qPCR павінен адпавядаць наступным патрабаванням:
1. Усталюйце 8-палоскавую прабірку для ПЦР аб'ёмам 0,2 мл
2. Маюць больш за чатыры канала выяўлення:
| Канал | Узбуджэнне (нм) | Выпраменьванне (нм) | Папярэдне адкалібраваныя фарбавальнікі |
| 1. | 470 | 525 | ФАМ, СІБР Грын І |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | Рокс, Тэхас-Чырвоны |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
ПЦР-платформы:
Сістэма ПЦР у рэжыме рэальнага часу 7500, Biorad CF96, сістэма выяўлення ПЦР у рэжыме рэальнага часу iCycler iQ™, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Цяжкасць транспарціроўкі халоднай ланцуга рэагента для выяўлення нуклеінавых кіслот новага коронавіруса
Калі звычайныя рэагенты для выяўлення нуклеінавых кіслот транспарціруюцца на вялікія адлегласці, захоўванне і транспарціроўка ў халоднай ланцугу (-20±5) ℃ неабходныя, каб гарантаваць, што біоактівность фермента ў рэагентах застаецца актыўнай.Каб упэўніцца, што тэмпература дасягае стандартнай, некалькі кілаграмаў сухога лёду неабходна на кожную скрынку рэагента для тэставання нуклеінавых кіслот, нават менш за 50 г, але гэтага можа хапіць толькі на два-тры дні.З пункту гледжання прамысловай практыкі, фактычная вага рэагентаў, якія выпускаюцца вытворцамі, складае менш за 10% (ці значна менш за гэты кошт) ад кантэйнера.Большая частка вагі прыпадае на сухі лёд, пакеты з лёдам і пенапласт, таму кошт транспарціроўкі надзвычай высокі.
У сакавіку 2020 года COVID-19 пачаў шырока распаўсюджвацца за мяжой, і попыт на рэагент для выяўлення нуклеінавых кіслот новага коронавіруса рэзка ўзрос.Нягледзячы на высокі кошт экспарту рэагентаў у халоднай ланцугу, большасць вытворцаў усё яшчэ могуць прыняць яго з-за вялікай колькасці і высокай прыбытку.
Аднак з удасканаленнем нацыянальнай экспартнай палітыкі супрацьпандэмічных прадуктаў, а таксама паляпшэннем нацыянальнага кантролю за патокамі людзей і матэрыяльна-тэхнічным забеспячэннем назіраецца павелічэнне і нявызначанасць часу транспарціроўкі рэагентаў, што прывяло да значных праблем з прадуктамі. шляхам транспарціроўкі.Павялічаны час транспарціроўкі (час транспарціроўкі каля паўмесяца вельмі часта) прыводзіць да частых збояў прадукту, калі прадукт трапляе да кліента.Гэта непакоіла большасць прадпрыемстваў па экспарту рэагентаў нуклеінавых кіслот.
Ліяфілізаваная тэхналогія для ПЦР-рэагенту дапамагла транспарціраваць рэагент для выяўлення нуклеінавых кіслот новага коронавіруса па ўсім свеце
Лиофилизированные ПЦР-рэагенты можна транспартаваць і захоўваць пры пакаёвай тэмпературы, што можа не толькі знізіць кошт транспарціроўкі, але і пазбегнуць праблем з якасцю, выкліканых працэсам транспарціроўкі.Такім чынам, ліафілізацыя рэагента - лепшы спосаб вырашыць праблему экспартных транспарціроўак.
Ліяфілізацыя ўключае замарожванне раствора ў цвёрды стан, а затым сублімацыю і аддзяленне вадзяной пары ў вакууме.Высушанае растворанае рэчыва застаецца ў ёмістасці з тым жа складам і актыўнасцю.У параўнанні са звычайнымі вадкімі рэагентамі, поўнакампанентны ліафілізаваны рэагент для выяўлення нуклеінавых кіслот Novel Coronavirus вытворчасці Liming Bio мае наступныя характарыстыкі:
Надзвычай моцная тэрмаўстойлівасць:ён можа выстаяць пры тэмпературы 56 ℃ на працягу 60 дзён, а марфалогія і прадукцыйнасць рэагента застаюцца нязменнымі.
Нармальная тэмпература захоўвання і транспарціроўкі:няма неабходнасці ў халоднай ланцугу, не трэба захоўваць пры нізкай тэмпературы перад распячатваннем, цалкам вызваліце месца для халоднага захоўвання.
Гатовы да выкарыстання:лиофилизация ўсіх кампанентаў, няма неабходнасці ў канфігурацыі сістэмы, пазбягаючы страты кампанентаў з высокай глейкасцю, такіх як фермент.
Мультыплексныя мішэні ў адной трубцы:мэта выяўлення ахоплівае новы ген ORF1ab коронавіруса, ген N, ген S, каб пазбегнуць генаварыяцыі віруса.Для таго, каб паменшыць ілжываадмоўныя, ген РНКазы Р чалавека выкарыстоўваецца ў якасці ўнутранага кантролю, каб задаволіць клінічныя патрэбы ў кантролі якасці ўзору.
