Раман Coronavirus (SARS-COV-2) Мультыплексны набор ПЦР у рэжыме рэальнага часу
Гэты вельмі адчувальны, гатовы да ўжывання камплект ПЦР даступны ў ліафілізаваным фармаце (працэс высушвання) для доўгатэрміновага захоўвання. Набор можна транспартаваць і захоўваць пры пакаёвай тэмпературы і стабільны на адзін год. Кожная трубка прэмікса змяшчае ўсе рэагенты, неабходныя для ўзмацнення ПЦР, у тым ліку зваротнага транскрыптазы, полімеразы Taq, праймераў, зондаў і субстратаў DNTPS. Патрэбна толькі дадаць 13UL дыстыляваную ваду і 5UL, здабыты шаблон РНК, тады яго можна запусціць і ўзмацняць на інструментах ПЦР.
Машына QPCR павінна адпавядаць наступным патрабаванням:
1. Усталюйце 8 палос PCR Tube Том 0,2 мл
2. У вас ёсць больш за чатыры каналы выяўлення:
| Канал | Узбуджэнне (нм) | Выкіды (нм) | Папярэдне калібраваныя фарбавальнікі |
| 1. | 470 | 525 | Fam, sybr Green i |
| 2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
| 3. | 571 | 621 | Рокс, Тэхас-чырвоны |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
ПЦР-платформы:
Сістэма ПЦР 7500AEL-часу, Biorad CF96, ICYCLER IQ ™ сістэмы выяўлення ПЦР, Stratagene MX3000P, MX3005P
Цяжкасць транспарціроўкі халоднай ланцуга новага рэагента выяўлення нуклеінавай кіслаты каранавіруса
Калі звычайныя рэагенты выяўлення нуклеінавай кіслаты транспартуюцца на вялікія адлегласці, для забеспячэння актыўнага захоўвання і транспарціроўкі халоднай ланцуга (-20 ± 5) для забеспячэння актыўнага захоўвання халоднай ланцуга. Каб пераканацца, што тэмпература дасягае стандарту, для кожнай скрынкі рэактыўнага рэагента ядра з нуклеінавай кіслаты спатрэбіцца некалькі кілаграмаў, але ён можа доўжыцца толькі два -тры дні. З пункту гледжання галіновай практыкі, фактычная вага рэагентаў, выдадзеных вытворцамі, менш за 10% (альбо значна менш, чым гэта значэнне) кантэйнера. Большая частка вагі паходзіць з сухога лёду, пакетаў лёду і пенапласту, таму кошт транспарту надзвычай высокі.
У сакавіку 2020 года Covid-19 пачаў выходзіць у вялікіх маштабах за мяжой, а попыт на новае рэагент выяўлення нуклеінавых кіслаты каранавіруса рэзка павялічыўся. Нягледзячы на высокі кошт экспарту рэагентаў у халодную ланцужок, большасць вытворцаў усё яшчэ могуць прыняць яго з -за вялікай колькасці і высокага прыбытку.
Аднак з паляпшэннем нацыянальнай экспартнай палітыкі антыпандэмічнай прадукцыі, а таксама абнаўленне нацыянальнага кантролю над патокам людзей і лагістыкі, існуе пашырэнне і нявызначанасць у час транспарціроўкі рэагентаў, што прывяло да прыкметных праблем прадукцыі, выкліканых праблемамі прадукцыі транспартам. Пашыраны час транспарціроўкі (час транспарціроўкі каля паўмесяца вельмі распаўсюджаны) прыводзіць да частых збояў у прадуктах, калі прадукт дасягае кліента. Гэта непакоіла большасць экспартных прадпрыемстваў нуклеінавай кіслаты.
Ліёфілізаваная тэхналогія рэагента ПЦР дапамагла транспарціроўцы новага каранавіруснага нуклеінавага выяўлення рэагента па ўсім свеце
Ліёфілізаваныя рэагенты ПЦР можна транспартаваць і захоўваць пры пакаёвай тэмпературы, што можа не толькі знізіць кошт транспарціроўкі, але і пазбегнуць праблем з якасцю, выкліканыя працэсам транспарціроўкі. Такім чынам, лиофилирующий рэагент - лепшы спосаб вырашыць праблему экспарту.
Ліёфілізацыя ўключае ў сябе замарожванне раствора ў цвёрдым стане, а затым сублімаваць і аддзяліць вадзяную пары пры вакуумным стане. Высушаны растваральнік застаецца ў кантэйнеры з аднолькавым складам і актыўнасцю. У параўнанні са звычайнымі вадкімі рэагентамі, поўнанакампанентныя лиофилизированные новыя рэагент выяўлення нуклеінавай кіслаты каранавіруса, які ўтвараецца ў выніку лімітавай біяграфіі, мае наступныя характарыстыкі:
Надзвычай моцная стабільнасць цяпла:Ён можа пры лячэнні стэндам на працягу 56 ℃ на працягу 60 дзён, а марфалогія і працаздольнасць рэагента застаюцца нязменнымі.
Нармальнае захоўванне і транспарціроўка тэмпературы:Няма неабходнасці ў халоднай ланцугу, не трэба захоўваць пры нізкай тэмпературы, перш чым расчысціцца, цалкам вызваліўшы халоднае месца для захоўвання.
Гатовы да выкарыстання:лиофилирующие ўсіх кампанентаў, адсутнасць неабходнасці канфігурацыі сістэмы, пазбягаючы страты кампанентаў з высокай глейкасцю, напрыклад, ферментам.
Мультыплексныя мэты ў адной трубцы:Мэта выяўлення ахоплівае новы ген Coronavirus orf1ab, ген N, S, каб пазбегнуць генаварыяцыі віруса. Для зніжэння ілжывага негатыўнага гена РНКазы РНазы выкарыстоўваецца ў якасці ўнутранага кантролю, каб задаволіць клінічную патрэбу ў кантролі якасці ўзору.
